(酶联免疫法)
作者: 江彬
Tel : 1991-4747-194
【原理与用途】
本试剂盒采用腺病毒纯化抗原预包被板ELISA 原理,检测人血清/血浆中存在的ADV-IgG 抗体,并配以酶标记抗人IgG单克隆抗体作为标记物。加入底物TMB显色后终止反应,在450nm波长测各孔O.D值,O.D值的大小与待检抗体含量成正比
本试剂盒用于定性检测呼吸道患者血清/血浆中存在的腺病毒(ADV)IgG抗体,其对呼吸道患者病因的诊断和鉴别诊断具有重要的辅助诊断意义。
【试剂盒组成】
1、纯化抗原包被板 48/96孔7、终止液1瓶
2、酶结合物1瓶 8、浓缩洗涤液(30倍)20ml×1瓶
3、阳性对照(直接使用) 1支9、样品稀释液(IgG)50ml×1瓶(48T)
50ml×2瓶(96T)
4、阴性对照(直接使用) 1支10、说明书1份
5、显色液A1瓶 11、密封袋1个
6、显色液B1瓶
【操作程序】
1、将样品稀释液1ml加入一洁净小管中,加入20ul手指或耳垂血,立即充分摇匀(如采用血清则1︰101稀释),1000rpm3分钟,吸取上清100ul加入孔中(或4℃静置过夜,次日取出不要振荡,直接吸取上清)。同时将阳性对照和阴性对照分别各加100ul/孔,另留一孔不加任何液体作空白对照,置37℃30分钟。
2、将浓缩洗涤液用蒸馏水做30倍稀释。
3、甩净孔中液体,洗板3次,每次停留30秒后甩净拍干,除空白对照外,每孔加酶标记物100ul(2滴),置37℃30分钟。
4、甩净孔中液体,同上洗板3次,拍干后每孔滴加显色液A、B各1滴,避光置37℃10分钟,每孔立即加入终止液1滴,混合后用酶标仪读数判定结果。
【结果判定】
以空白孔调零,用酶标仪450nm波长测定A值:
(1)P/N=标本A值/ 阴性对照A值。
(2)P/N≥2.1为阳性;
(3)P/N<2.1为阴性。
(4)阴性对照(NC)小于0.10时以0.1计。
【注意事项】
1、试验前将试剂盒先置室温平衡20~30分钟。
2、剩余的板条用不干胶密封并放入密封袋中4℃保存。
3、滴加试剂前应将液体翻转数次混匀,滴加时保持瓶身垂直。
4、洗涤时每孔均须加满,防止孔内有游离酶不能洗净。
5、避免用溶血、混浊或脂血标本。最好用新鲜标本,如需保存,可于2-8℃冷藏48小时或-20℃冻存4周(样本应避光)。
【保存及有效期】
保存2~8℃,有效期10个月。